جرت على قاعة المرحوم الاستاذ الدكتور فهد علي حسين المناقشة العلنية لأطروحة طالب الدكتوراه سليمان محمود حسن من قسم علوم الكيمياء والموسومة :
دراسات بايو-كيميائية على المراسل المزدوج للبروتين ج والمنقى جزئياً في مرضى السكري ومرضى الاعتلال السكري الكلوي
وتألفت لجنة المناقشة من التدريسيين الأفاضل :
ا.د. محمد عبدالمنذر عثمان رئيسا
ا.م.د. بشرى حميد علي عضوا
ا.م د. ايمان عبدعلي عضوا
ا.م.د. مصطفى طه محمد عضوا
ا.م.د. علاء حسين جواد عضوا
ا.د. زينب منيب مالك عضوا ومشرفا
وهدفت الدراسة إلى تحديد مستويات الجلوكاجون مثل الببتيد -1 و المراسل المزدوج للبروتين ج في مرضى السكري ومرضى الاعتلال السكري الكلوي ومقارنة النتائج مع مجموعة السيطرة. بالإضافة إلى دراسة العلاقة بين الجلوكاجون مثل الببتيد -1 و المراسل المزدوج للبروتين ج مع نسبة السكر التراكمي و السكر و اليوريا والكرياتينين والدهون ، والتي قد تكون مفيدة في مكافحة داء السكري ومضاعفاته .
تم اخذ مائة وخمسون عينة في هذه الدراسة حيث تراوحت الأعمار (40-65) سنة والتي تم تقسيمها إلى ثلاث مجموعات على النحو التالي: المجموعة الأولى (G1) تتكون من 50 فردًا أصحاء كمجموعة تحكم ، المجموعة الثانية (G2) تتكون من 50 مريضًا مع مرضى السكري ومجموعة ثالثة (G3) يتكون من 50 مريضا يعانون من اعتلال الكلية السكري.
أظهرت النتائج ارتفاعًا ملحوظًا في السكر ونسبه السكر التراكمي و اليوريا و الكرياتينين في G2 و G3 مقارنة بـ G1 و G3 مقارنة بـ G2. تظهر النتائج انخفاضا غير ملحوظ في مستويات الألبومين في G2 مقارنة مع G1 ، ومع ذلك ، هناك انخفاض كبير في G3 مقارنة G2 و G1.
أظهرت النتائج ارتفاعًا ملحوظًا في مستويات (TC ، TG ، LDL-c ، VLDL-c) في G2 و G3 مقارنة بـ G1. في حين وجد انخفاض ملحوظ في مستويات HDL في G2 و G3 مقارنة بـ G1.Also ، ارتفاع ملحوظ في (TC ، TG ، LDL-c ، VLDL-c) في G3 مقارنة G2 ، في حين أن هناك انخفاض غير ملحوظ في HDL في G3 مقارنة G2.
أظهرت النتائج ارتفاعًا ملحوظًا في مستويات الأنسولين في G2 و G3 مقارنةً بـ G1. كما لوحظت زيادة ملحوظة في G3 مقارنةً بـ G2.
لوحظ ارتفاع ملحوظ في مستويات GLP-1 و GPCR في G2 و G3 مقارنة مع G1. أيضا لوحظت فروق ذات دلالة إحصائية في G3 مقارنة G2 .
أظهرت النتائج وجود علاقة سلبية غير معنوية بين GLP-1 واليوريا لـ G1 (r1 = -0.146) ، <0.05)) ، بينما توجد علاقة ارتباط ذات دلالة في G2 (r2 = 0.435) ، P> 0.05)). شوهد ارتباط سلبي كبير في G3 (R3 = -0.0729) ،( P <0.05). وأظهرت الدراسة أيضا وجود علاقة غير ذات دلالة بين GLP-1 و كرياتنين لـ (G1 (r1 = 0.453،( P <0.05). في الوقت نفسه توجد علاقة ارتباط موجبة معنوية في G2 (r2 = 0.210)، P <0.05)). ولوحظ ارتباط سلبي كبير لـ G3 (R3 = -0.439) ، P <0.05)). علاقة الارتباط بين GLP-1 و السكر. أوضحت النتائج وجود علاقة سلبية غير محددة في G1 (r1 = -0.120) ، P <0.05)). في حين تم العثور على ارتباط إيجابي كبير في G2 و G3 (R2 = 0.523) ، R3 = 0.323) ), P) >0.05) . كشفت الدراسة عن وجود علاقة إيجابية غير واضحة بين GLP-1 والأنسولين في G1 (r1 = 0.070)،( P>0.05). في الوقت نفسه هناك ارتباط سلبي كبير في G2 وG3
(0.113- = r2)،( r3 = -0.309، P<0.05).
كشفت النتائج أيضًا عن وجود علاقة موجبة غير معنوية بين GPCR و HbA1c فيG1 r1=0.172)) بينما وجد ارتباط إيجابي موجب في G2 (r2 = 0.427) وارتباط سلبي كبير في G3 (r3 = -0.042). أظهرت النتائج أيضًا وجود ارتباط إيجابي غير معنوي في G1 بين GPCR والكولسترول (r1 = 0.306، P>0.05). في حين أن هناك علاقة إيجابية كبيرة فيG2 R2 = 0.514) ، P>0.05). وعلاقة سلبية كبيرة بين GPCR والكوليسترول في G3
r3=-0.288) ، P>0.05). علاقة سلبية غير معنوية بين GPCR و TG في G1
(r1 = -0.0009، P<0.05). في حين أن هناك علاقة سلبية كبيرة في G2 تم العثور عليها
(r2= -0.292 ، P>0.05). أيضا ، كشفت النتائج وجود علاقة إيجابية كبيرة بين GPCR و الدهون الثلاثية في G3 (R3 = 0.276) ، P>0.05).
الجزاء الثاني من البحث تضمن:
هدفت الدراسة إلى تنقية مستقبل البروتين G من الدم لمرضى اعتلال الكلية السكري ومرضى السكري عن طريق تقنيات الكروماتوغرافيا المختلفة ، والتي تعتبر أبسط نموذج للتنقية ودراسة بنية ووظيفة مستقبل البروتين في خلية حقيقية النواة . تم استخلاص مستقبل G البروتين من خلية كاملة وغشاء بواسطة ترسيب البروتينات مع 50 – 75٪ من كبريتات الأمونيوم ، وتم تبريده بالطرد المركزي عند 3500 جم لمدة 10 دقائق. وأخيرا ، تم حل الكرية في الحد الأدنى من حجم (1.5 ملم) محلول منظم PBS Ph) 7.3 ) . تم إذابة خلايا المترسبه وعلق في عازلة استخراج ثم تذوب في عازلة الفوسفات التي تحتوي على DDMكمنظفات. تم تنقيته المستقبلة G البروتين المتلقية من خلية كاملة بواسطة كروماتوجراف التبادل الأيوني كخطوة أولى باستخدام DEAE-Sepharose. تطبيق كروماتوجرافيا الجل الترشيح كخطوة ثانية للتنقية.
تم تحديد الوزن الجزيئي لـ مستقبل G البروتين بواسطة SDS.PAGE.
أظهرت نتائج التحليل الكروماتوجرافي التبادلي الأيوني لمريض السيطرة ذروتين بروتينتين ظهرتا بعد الشطف بواسطة تركيز متدرج من كلوريد الصوديوم ، في حين لم تظهر أي قمم للبروتين في أجزاء الغسل. تم قياس تركيز GPCR في كسور هذين القمتين البروتين. أشارت البيانات إلى أن GPCR تقع في أول ذروة البروتين (المصفوفة في 0.1 M من كلوريد الصوديوم) بأرقام الكسور بين (6 و 12). القمم الثانية (المصفوفة في 0.2 M من NaCl) تعطي الذروة بين (18-20).
أظهرت النتائج لمريض المصاب بالسكري اثنين من قمم البروتينات التي ظهرت بعد شطف تركيز متدرج من كلوريد الصوديوم ، في حين لم تظهر أي قمم للبروتين في أجزاء الغسيل. تم قياس تركيز GPCR في كسور هذين القمتين البروتين. أشارت البيانات إلى أن GPCR تقع في أول قمة بروتين (تمت التصفية في 0.1 M من NaCl) بأرقام الكسور بين (7 و 13). القمم الثانية (المصفوفة في 0.2 M من NaCl) تعطي الذروة بين (18-20).
أظهرت النتائج لمريض اعتلال الكلية السكري اثنين من قمم البروتينات التي ظهرت بعد شطف بواسطة تركيز التدرج من كلوريد الصوديوم ، في حين لم تظهر قمم البروتين في الكسور الغسيل. تم قياس تركيز GPCR في كسور هذين القمتين البروتين. أشارت البيانات إلى أن GPCR تقع في أول ذروة البروتين (المصفوفة في 0.1 M من كلوريد الصوديوم) في أعداد الكسور بين (7 و 13). القمم الثانية (المصفوفة في 0.2 M من NaCl) تعطي الذروة بين (19-21).
كان الوزن الجزيئي لـ GPCR الذي يقدره الرحلان الكهربائي SDS-PAGE هو ما يقرب من شريطين من GPCR يظهران في عينه الاصحاء (~ 30 د.ك) و عند (~51 د.ك). GPCR. كما ذكر أن الشكل الأحادي مهم لتنشيط ج بروتين للارتباط
كما أظهرت النتائج ظهور ثلاثة نطاقات متعلقة بـ GPCR في (~ 29 د.ك) و (47،49 د.ك). في حين أنه ليس واضحا جدا لتركيزاته الصغيرة. في مجموعه اعتلال الكلية السكري أيضا بدا مشابها للأشرطةالتي ظهرت في G2.
وحضر المناقشة جمع من التدريسيين وطلبة الدراسات العليا وذوي الطالب والضيوف الكرام .تمنياتنا للطالب الموفقية والنجاح